质粒DNA质量影响转染吗?

转染成功与否在很大程度上取决于质粒DNA的纯度和质量。以下是确保成功转染需要考虑的四个关键点。

1. 质粒DNA应该主要是超螺旋的，不含基因组DNA和RNA。
   
   • 环状质粒DNA被细胞更有效地吸收
   • 基因组DNA或RNA污染混淆量化
2. 质粒DNA应高度浓缩，不含酚、盐和蛋白质。
   
   • 高浓度质粒不会稀释转染试剂
   • 苯酚会扭曲吸光度读数，对细胞有毒
   • 盐和蛋白质可以抑制dna -脂质复合物的形成
3. 质粒DNA应不含内毒素。
   
   • 裂解过程中释放的内毒素可与质粒DNA共纯化
   • 内毒素降低转染效率，对敏感细胞有毒
4. 质粒DNA应该是正确的序列。
   
   • 确认质粒的正确性对于实现实验目标至关重要。
   • 质粒DNA在这些类型的反应中的表现也是质粒纯度和转染适用性的一个很好的评估。