EZ-96 德赢vwin体育平台入口DNA甲基化试剂盒
D5004 / D5003
EZ-96 德赢vwin体育平台入口DNA甲基化试剂盒
| 猫# | 的名字 | 大小 | 价格 | 数量 |
|---|---|---|---|---|
| D5004 | EZ-96 德赢vwin体育平台入口DNA甲基化试剂盒(Deep-Well) | 2 × 96 Rxns | 380.00美元 |
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| D5003 | EZ-96 德赢vwin体育平台入口DNA甲基化试剂盒(浅孔) | 2 × 96 Rxns | 380.00美元 |
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文档
突出了
- 简化的，经过验证的亚硫酸氢盐DNA转换程序。
- 96孔自旋柱板对亚硫酸盐处理DNA的脱硫和回收。
- 回收的DNA是理想的下游分析，包括PCR，内切酶消化，测序，微阵列等。
描述
| 应用程序 | 纯化，转化的DNA是高质量的，非常适合下游过程，包括文库准备下一代测序，PCR扩增等。目录# D5004推荐与Illumina Infinium MethylationEPIC串珠芯片阵列一起使用。 |
|---|---|
| 转换 | ＞99% |
| 洗脱体积 | 深井≥15 μ l 浅井≥30 μ l |
| 设备 | 带加热盖的热循环器，带平板载体的摆动斗离心机。 |
| 输入 | 500 pg - 2µg DNA |
| 处理时间 | 12到16小时 |
| 复苏 | > 80% |
| 样本来源 | 纯化的基因组DNA，内切酶消化的DNA，线性化的质粒DNA等。DNA应该是高质量的，不含rna的。 |
| 补充信息 |
Q1:是什么导致了低转换效率/低收益?
较差的转化效率和较低的收率可能是由于各种不同的实验特定条件。请联系技术支持，讨论您的具体实验条件，并与产品专家进行进一步的故障排除。
Q2:如何量化/可视化转化的DNA?
在亚硫酸氢盐处理基因组DNA后，非甲基胞嘧啶残基转化为尿嘧啶。恢复的DNA通常是富含A、U和t的。原来的基对不再存在。相反，它是单链的，在室温下具有有限的非特异性碱基配对。在260 nm处的吸收系数与RNA相似。当测定回收的亚硫酸盐处理DNA的浓度时，Ab260 = 1.0时，使用40 μg/ml的值。为了可视化，把转化的DNA放在琼脂糖凝胶上，然后把凝胶放在冰上冷冻30分钟。预期涂抹范围在100-1500bp之间。
Q3:可回收的最小DNA尺寸是多少?
> 50个基点。
Q4:亚硫酸氢盐转化的DNA在-20°C下能稳定多久?
转换后的DNA应在m -洗脱缓冲液中洗脱，以保持转换后的DNA长期保存的稳定性。如果长期保存(<-20C)，样品应保存一个月以上。尽量减少冷冻/解冻以保持亚硫酸氢盐转化DNA稳定。
问5:亚硫酸氢盐转化是否只发生在CpG环境中?
亚硫酸氢盐转化可以在任何环境下工作，因此试剂盒与来自植物和其他非cpg甲基化水平高的物种的基因组DNA兼容。
Q6:是否建议使用脱硫缓冲液孵育超过20分钟?
将脱硫缓冲液留在色谱柱上的时间超过建议的时间将导致更多的降解，进而导致较低的产量。
问7:亚硫酸氢盐转化DNA的扩增推荐哪种聚合酶?
ZymoTaq DNA聚合酶专门设计用于亚硫酸氢盐扩增反应。ZymoTaq可作为单独的聚合酶(E2001/E2002)，预混物(E2003/E2004)和qPCR预混物(E2054/E2055)。
亚硫酸氢盐底漆设计要点?
| 猫# | 的名字 | 大小 | 价格 | |
|---|---|---|---|---|
| D5002-2 | M-Dilution缓冲 | 5.2毫升 | 10.00美元 | |
| D5007-6 | M-Elution缓冲 | 8毫升 | 10.00美元 | |
| D5003-1 | CT转换试剂(96次转换) | 1瓶 | 63.00美元 | |
| D5002-5 | M-Desulphonation缓冲 | 40毫升 | 42.00美元 | |
| D5002-3 | M-Binding缓冲 | 80毫升 | 38.00美元 | |
| D5007-4 | M-Wash缓冲 | 36毫升 | 37.00美元 | |
| C2003 | 洗脱板 | 2板 | 19.00美元 | |
| C2002 | 收集板 | 2板 | 22.00美元 | |
| C2005 | 带覆箔的转换板 | 2盘/箔 | 10.00美元 | |
| C2001 | 硅板 | 2板 | 129.00美元 | |
| C2004 | Zymo-Spin i - 96 | 2板 | 142.00美元 | |