混合！主管细胞-JM109
T3003 / T3005
混合！主管细胞-JM109
| 猫 ＃ | 姓名 | 尺寸 | 价格 | 数量 |
|---|---|---|---|---|
| T3003 | 混合！主管细胞-JM109 | 10 x 100 µL | $ 129.00 |
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| T3005 | 混合！主管细胞-JM109 | 96 x 50 µl | $ 494.00 |
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文件
强调
- 简单的20秒转换：没有热冲击！只需添加DNA并在板上散布即可。
- 高转化效率：实现108-109每µg质粒DNA。
- 多才多艺的：非常适合一般克隆，蓝白筛选和质粒分离。
描述
| 附加信息 | 部分限制缺陷；克隆重复DNA（RECA-）的良好应变。当有谷氨酰胺可用时，抑制许多琥珀突变，但不能抑制λgt11的S100或S7突变。可用于M13克隆/测序和蓝色/白色筛选。 |
|---|---|
| 基因型 | f` [trad36 proa+b+laclqΔ（lacz）m15]δ（lac-proab）glnv44（supe44）e14-（mcra-）thi gyra96（nalr）enda1 enda1 enda1 hsdr17（rk-mk+） |
| 处理时间 | 20秒 |
| 产品存储 | -70°C至-80°C |
| 补充信息 | |
| 转化效率 | 108-109每µg质粒DNA转化体 |
Q1：合格的细胞是转基因生物吗？
我们所有的合格细胞都分为生物安全1级，不是遗传修饰的生物。只有当用质粒转化时，它们才会成为转基因生物。
Q2：是混合！菌株DAM+和DCM+？
除非在基因型中明确指出，否则大多数克隆菌株将是DAM+/DCM+。
Q3：做混合！菌株甲基化DNA？
是的
Q4：哪些菌株等同于Zymo菌株？
DH5α等于Zymo5α。DH10B，TOP10和One Shot Top10等于Zymo 10b。对于XL-21蓝色，JM109是最接近的匹配，对于STBL3，HB101是最接近的匹配。
问题5：如何减少琼脂板上的卫星菌落？
- 准备新鲜的琼脂板 - 在板上使用更多的抗生素 - 孵化板在板上较短的时间内孵育较短的时间
Q6：是否可以稀释合格的细胞？
我们不建议稀释合格的细胞。我们建议在转化之前使用较少的DNA转化细胞或等分试样的细胞。如果绝对必要，则应在稀释度中使用冷1倍胜任缓冲液（Mix＆Go转换套件，T3001和T3002）。
Q7：可以与哪种抗生素一起使用混合！程序？
当使用氨苄西林或卡宾西林进行选择时，无需生长。然而，由于抗生素本身的作用方式，使用氯霉素，卡纳霉素和四环素时，需要一个生长步骤。我们建议对生长步骤进行以下步骤：1。添加质粒后在冰上孵育5-10分钟2.加入4卷SOC介质3.在37°C下孵育60分钟60分钟，在200-300时轻轻摇动RPM 4.在包含适当抗生素的预热培养板上散布
Q8：哪个质粒大小可用于转化？
对于Zymo5α和Zymo 10b，最高为20KB。然而，转化效率与10-20KB成比例降低。高于20kb的细胞很难转化。JM109，HB101，XJA，XJA（DE3），XJB，XJB（DE3）和TG1可以处理最多10KB的构造。
Q9：推荐的DNA浓度和转化的体积是哪个？
确实没有最大或最小建议的DNA浓度，但是我们使用10 pg进行质量控制。但是，添加的DNA量不应超过细胞总量的5％。随着使用的DNA体积的增加，效率可以降低几倍。如果DNA样品过于稀释，请使用我们的DNA清洁和浓缩器。
Q10：提高转型效率的哪些技巧？
1.在冰上解冻细胞，而不是室温。2.在冰上孵育细胞和DNA混合物，而不是在室温下。但是，请勿孵化时间比1小时更长。3.确保接收时仍会冷冻细胞。4.将培养板在37°C下预热至少30分钟。5.准备含有适当抗生素的新鲜LB琼脂板。6.准备新的DNA样品。7.将细胞存储在-80°C（而不是4°C或-20°C）。如果冰柜断裂，只要温度不超过-50°C，细胞应可以。8.避免冻结/解冻周期。
问题11：热震将如何影响我的转化效率？
没有必要进行热冲击，但是有时在准备库或转换XJB自动解析时可能是受益人大肠杆菌菌株。我们建议使用以下产物进行以下方案：1。添加质粒后在冰上孵育5-10分钟。2.在42°C下孵育45秒。3.将450毫升SOC添加到细胞中。4.在37°C下孵育60分钟，在200-300 rpm处轻轻摇动。5.在包含适当抗生素的预热培养板上散布。