混合和走！竞争力的细胞-TG1
T3017.
强调
- 简单的20秒转换：没有热休克！只添加DNA并在板上涂抹。
- 高转化效率：实现10.8.- 10.9.每μg质粒DNA。
- 多才多艺的：优秀的一般克隆，蓝白筛选和质粒分离。
描述
| 附加信息 | 可用于一般克隆和蓝/白筛选。 |
|---|---|
| 基因型 | f'[Trad36LACIQδ（LACZ）M15 PROA + B +] GLNV（SUPE）THI-1δ（MCRB-HSDSM）5（RK-MK-MCRB-）THIδ（LAC-PROAB） |
| 处理时间 | 20秒 |
| 产品存储 | -70°C至-80°C |
| 补充信息 | |
| 转型效率 | 10.8.- 10.9.每μg质粒DNA的转化体 |
Q1：哪种抗生素可以使用混合和走！程序？
在使用氨苄青霉素或碳皮尼林选择时，不需要过度。然而，由于抗生素本身的作用方式，使用氯霉素，卡那霉素和四环素时需要出现的过度步骤。我们建议在加入质粒后孵育冰上孵化冰上的细胞5-10分钟。2.添加4个SoC媒体。3.在37℃下孵育60分钟，温和振动，200-300转。4.涂在含有适当抗生素的预热培养基上。
Q2：热冲击将如何影响我的转化效率？
没有必要热休克，但有时它可以在制备文库或转化XJB Autolys时是受益人大肠杆菌菌株。我们建议以下议定书进行热冲击，并在加入质粒后孵育冰上5-10分钟的细胞。2.在42℃下孵育细胞45秒。3.将450毫升SOC加入细胞。4.在37℃下孵育60分钟，温和振动，200-300 rpm。5.在含有适当抗生素的预热培养板上涂抹在预热的培养基上。
Q3：是有能力的细胞转基因生物吗？
我们所有的珍级细胞都分为生物安全级别1，并且不是遗传修饰的生物。只有当他们用质粒转化时，他们就会成为转基因生物。
Q4：是混合和走！菌坝+和DCM +？
除非在基因型中特别注意，否则大多数克隆菌株将是坝+ / DCM +。
Q5：做混合和走！菌株甲酸酯DNA？
是的
Q6：哪种菌株相当于Zymo菌株？
DH5α相当于Zymo5α。DH10B，TOP10和一个射击TOP10相当于ZYMO 10B。对于XL-21蓝色，JM109是最接近的匹配和STBL3，HB101是最接近的匹配。
Q7：如何减少琼脂板上的卫星菌落？
- 准备新鲜琼脂平板 - 使用板材的更多抗生素 - 孵育平板电镀细胞后的较短时间
Q8：是否有可能稀释主管细胞？
我们不建议稀释主管细胞。我们建议使用较少的DNA在转换之前使用较少的DNA来转化细胞，或在较小的体积中的等分试样细胞。如果绝对必要，应在稀释中使用冷1x态度缓冲区（混合和转换套件，T3001＆T3002）。
Q9：提高转化效率的一些提示是什么？
1.冰上的解冻细胞，而不是室温。2.在冰上孵育细胞和DNA混合物，而不是室温。然而，不要孵育更长时间1小时。3.收到时，确保细胞仍然冻结。4.在37℃下预热培养板至少30分钟。5.制备含有适当抗生素的新鲜LB琼脂平板。6.准备新的DNA样品。7.将细胞存放在-80°C（不是4°C或-20°C）。如果冰箱中断，只要TEMP不高于-50°C，电池就应该正常。8.避免冻结/解冻周期。
Q10：哪种质粒尺寸可用于转化？
对于Zymo5α和Zymo 10b至20kb。然而，转化效率从10-20kb成比例地降低。在20KB以上，细胞难以转化。JM109，HB101，XJA，XJA（DE3），XJB，XJB（DE3）和TG1可以处理高达10KB的构造。
Q11：哪种推荐的DNA浓度和转化体积？
确实没有最大或最小的DNA浓度，但我们使用10 pg进行质量控制。然而，添加的DNA体积不应超过细胞总体积的5％;随着使用的DNA的体积增加，效率可以减少几倍。如果DNA样品过于稀释，请使用我们的DNA清洁和浓缩器。