快速DNA粪便/土壤微生物微生物套件
D6010
强调
- 用于在几分钟内分离来自粪便样品的无抑制剂的PCR质量DNA的快速方法，包括来自人，鸟类，大鼠，小鼠，牛等。
- 超高密度Bashingbeads是抗骨折和化学惰性的。
- Zymo-Spin柱和独特的过滤技术有效地从DNA产品中除去PCR抑制剂。
描述
| 适用于 | 所有敏感的下游应用，如QPCR和下一代测序。 |
|---|---|
| 洗脱量 | ≥50μL. |
| 设备 | Microcentrifuge，Vortex，Cell破坏器/粉碎机 |
| 处理卷 | ≤150mg粪便，≤250mg土壤，≤100mg真菌/细菌细胞（湿重） |
| 纯度 | A260 / A280nm≥1.8。 |
| 样本来源 | 粪便或土壤 |
| 样本存储 | DNA储存在≤-20°C。 |
| 尺寸范围 | 能够恢复高达40kb的基因组DNA。在大多数情况下，也将回收线粒体DNA和病毒DNA（如果存在）。 |
| 补充信息 | |
| 类型 | 总DNA |
| 屈服 | ≤25μg总DNA |
Q1：我的裂解物似乎粘稠。什么导致这种情况发生？我怎样才能解决这个问题？
粘性样品可以表示样品裂解不完全。尝试使用更少的样本并优化珠子跳动条件（持续时间，速度，时间），以确保样品彻底裂开。在珠子跳动后，在继续前进之前颗粒碎屑。将更多的基因组裂解缓冲液加入裂解物可以有助于稀释和剥夺样品，使样品更少粘稠，更适合于DNA回收。
Q2：是否有优化珠跳动条件有什么尖端？
我们已经验证了我们的套件，具有高速的主生线和低速破坏者。我们强烈推荐用户以优化他们自己的乐器的珠子跳动条件。我们建议使用2毫升管适配器确保珠子跳动是有效的（不要使用由泡沫制成的适配器）。对于高速均化器，我们建议总共5分钟的珠子跳动（6.5米/秒，休息5分钟，重复5次）。对于低速细胞破坏者，我们推荐30分钟以最大速度。
Q3：Zymo-Spin III-HRC步骤的目的是什么？
环境样品通常含有抑制剂，例如影响下游应用的多酚，腐殖质/富酸，单宁，黑色素等。一旦将DNA洗脱结合塔后，然后通过Zymo-Spin III-HRC通过Zymo-Spin III-HRC以除去PCR抑制剂，然后将DNA用于下游应用。Zymo-Spin III-HRC不结合DNA，它只是除去PCR抑制剂。Zymo-Spin III-HRC可以作为Onestep PCR抑制剂试剂盒单独购买（D6030）。
Q4：是否有必要添加β-巯基乙醇？这一步可以替代或省略吗？
建议添加β-巯基乙醇以增强样品裂解，但可以用二硫醇（DTT，终浓度为10mM）取代。然而，如果优化珠子跳动并且裂解是有效的，则不需要添加BME并且可以省略。
Q5：何时可以在协议中实施rnase治疗？
在套件容量内处理样品时，不需要额外的RNase进行治疗。选择性化学允许双链DNA与柱的结合，并用于RNA流过。
| 猫 ＃ | 姓名 | 尺寸 | 价钱 | |
|---|---|---|---|---|
| S6012-50 | Zr Bashingbead裂解管（0.1＆0.5 mm） | 50个管子 | 联系 价钱 |
接触 |
| C1078-50 | Zymo-Spin IICR柱 | 50包 | 55.00美元 | |
| C1058-50 | Zymo-Spin III-HRC过滤器 | 50包 | $ 108.00 | |
| C1057-50 | Zymo-Spin III-F过滤器 | 50包 | 59.00美元 | |
| D6001-3-40. | Bashingbead缓冲区 | 40毫升 | $ 29.00 | |
| D6035-1-30 | 预备解决方案 | 30毫升 | $ 18.00 | |
| d3004-5-15 | DNA预洗缓冲液 | 15毫升 | 10.00美元 | |
| D3004-1-100 | 基因组裂解缓冲液 | 100毫升 | $ 60.00 | |
| D3004-2-50 | G-DNA洗涤缓冲液 | 50毫升 | $ 18.00 | |
| D3004-4-10 | DNA洗脱缓冲液 | 10毫升 | $ 14.00 | |