Quick-DNA粪便/土壤微生物微生物
D6012
强调
- 快速方法是在几分钟内从粪便样品中分离出无抑制剂，PCR质量的DNA，包括人类，鸟类，大鼠，小鼠，牛等。
- 超高密度bashingbeads是抗断裂的，并且化学惰性。
- Zymo-Spin柱和独特的过滤技术有效地从DNA产物中去除PCR抑制剂。
描述
| 适用于 | 所有灵敏的下游应用，例如QPCR和下一代测序。 |
|---|---|
| 洗脱量 | ≥20µL |
| 设备 | 微输出，涡流，细胞破坏者/粉碎机 |
| 处理量 | ≤50毫克的粪便，≤250毫克土壤，≤20毫克真菌/细菌细胞（湿重） |
| 纯度 | A260/A280nm≥1.8。 |
| 样本源 | 粪便或土壤 |
| 样品存储 | DNA存储在≤ -20°C下。 |
| 尺寸范围 | 能够恢复至40 kb的基因组DNA。在大多数情况下，也将回收线粒体DNA和病毒DNA（如果存在）。 |
| 补充信息 | |
| 类型 | 总DNA |
| 屈服 | ≤5µg总DNA |
Q1：我的裂解物似乎是粘性的。是什么原因导致这种情况？我怎样才能解决这个问题？
粘性样品可能表明样品裂解不完全。尝试使用较少的样品并优化珠子跳动条件（持续时间，速度，时间），以确保样品彻底裂解。珠子跳动后，在继续前进之前将细胞碎片颗粒。在裂解液中添加更多的基因组裂解缓冲液可以帮助稀释和剥夺样品，从而使样品较少粘稠，更适合DNA恢复。
Q2：有什么技巧可以使珠子跳动条件做出任何措施？
我们已经用高速同伴和低速破坏者验证了我们的套件。我们强烈建议用户为自己的乐器优化其珠子跳动条件。我们建议使用2毫升管适配器来确保珠子跳动是有效的（请勿使用由泡沫制成的适配器）。对于高速匀浆器，我们建议总共5分钟的珠子跳动（以6.5 m/s的速度间隔1分钟，休息5分钟，重复5次）。对于低速细胞干扰器，我们建议以最大速度30分钟。
Q3：Zymo-Spin II-µHRC步骤的目的是什么？
环境样品通常包含影响下游应用，例如PCR等抑制剂，腐殖质/富维酸，单宁，黑色素等。将DNA从结合柱上洗脱后，然后通过Zymo-Spin II-µHRC通过DNA去除PCR抑制剂，然后将DNA准备好以进行下游应用。Zymo-Spin II-µhRC不结合DNA，它只是去除PCR抑制剂。
问题4：是否有必要添加β-汞乙醇？可以替换或省略此步骤吗？
建议添加β-汞乙醇以增强样品裂解，但可以用二硫代硫醇（DTT，最终浓度为10 mm）取代。但是，如果优化了珠子跳动并有效地裂解，则无需添加BME，可以省略。
Q5：RNase何时可以在协议中实施治疗？
处理套件容量以内的样品时，无需其他RNase治疗。选择性化学允许将双束DNA与色谱柱结合并使RNA流过。
| 猫 ＃ | 姓名 | 尺寸 | 价格 | |
|---|---|---|---|---|
| D3004-1-100 | 基因组裂解缓冲液 | 100毫升 | $ 60.00 | |
| D3004-2-50 | G-DNA洗涤缓冲液 | 50毫升 | $ 18.00 | |
| D3004-4-10 | DNA洗脱缓冲液 | 10毫升 | $ 14.00 | |
| D3004-5-15 | DNA预洗缓冲液 | 15毫升 | $ 10.00 | |
| D6001-3-40 | BashingBead缓冲区 | 40毫升 | $ 29.00 | |
| D6035-1-30 | 准备解决方案 | 30毫升 | $ 18.00 | |
| C1057-50 | Zymo-Spin III-F过滤器 | 50包 | $ 59.00 | |
| C1004-50 | Zymo-Spin IC列 | 50包 | $ 53.00 | |
| C1059-50 | Zymo-Spin II-µHRC过滤器 | 50包 | $ 108.00 | |
| S6012-50 | ZR BashingBead裂解管（0.1和0.5毫米） | 50管 | 联系人 价钱 |
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