快速-DNA真菌/细菌培养基试剂盒
D6105
突出了
- 提高检测:包括BashingBeads确保对难溶样品的完全裂解。
- 超纯:准备进行qPCR，次世代测序，阵列等。
- 简单:工作流程最快(≤20分钟)。
描述
| 适用于 | 所有敏感的下游应用，如qPCR和下一代测序。 |
|---|---|
| 洗脱体积 | ≥150µl |
| 设备 | 离心机，真空源和歧管，微离心机，细胞干扰器/粉碎机w/ 50毫升管适配器 |
| 处理时间 | ≤20分钟 |
| 处理体积 | 真菌或细菌≤500mg(湿重)，5x109细菌细胞,5 x108酵母细胞，或5x107哺乳动物细胞 |
| 纯度 | 典型A260/A280 & A260/A230≥1.8 |
| 样本来源 | 真菌和细菌细胞培养，孢子，花粉，线虫，以及其他微生物也可以取样。 |
| 尺寸范围 | 可恢复基因组DNA≥40kb。典型的片段大小在25到35 kb之间。如果存在，寄生DNA和病毒DNA也将被恢复。 |
| 补充信息 | |
| 类型 | 总DNA |
| 收益率 | 总DNA≤125µg |
在优化珠粒打浆条件方面有什么窍门吗?
我们已经通过高速均质器和低速干扰器验证了我们的套件。我们强烈建议用户为自己的仪器优化他们的珠跳动条件。我们建议使用50毫升管的适配器，以确保打珠有效(不要使用泡沫制成的适配器)。对于高速均质机，我们建议共打珠5分钟(每隔1分钟，6.5 m/s，休息5分钟，重复5次)。对于低速电池干扰器，我们建议在最大速度下30分钟。
Q2:裂解液看起来粘稠。是什么导致了这种情况的发生?我该如何解决这个问题?
有粘性的样品表明样品不完全溶解。尝试使用更少的样品和优化珠跳动条件(持续时间，速度，时间)，以确保样品被彻底分解。打珠后，将细胞碎片制成小球，然后继续。在裂解液中加入更多的基因组裂解缓冲液有助于稀释和脱蛋白，使样品粘度降低，更适合DNA恢复。
Q3:是否需要加入-巯基乙醇?这个步骤可以被替换或省略吗?
建议添加-巯基乙醇以促进样品裂解，但可以用二硫苏糖醇(DTT，最终浓度为10 mM)取代。但是，如果珠磨优化，裂解效率高，则不需要添加BME，可以省略。
Q4: RNase A治疗何时可以在协议中实施?
在试剂盒容量内处理样品时，不需要额外的RNase A处理。选择性化学使双链DNA与色谱柱结合，使RNA通过。
| 猫# | 的名字 | 大小 | 价格 | |
|---|---|---|---|---|
| d3004 - 1 - 100 | 基因组裂解缓冲 | 100毫升 | 60.00美元 | |
| D3004-2-50 | g-DNA清洗缓冲 | 50毫升 | 18.00美元 | |
| D3004-4-16 | DNA洗脱缓冲 | 16毫升 | 18.00美元 | |
| D3004-5-15 | DNA预缓冲 | 15毫升 | 10.00美元 | |
| C1001-50 | 集合管 | 50包 | 15.00美元 | |
| C1021-25 | ||||
| S6010 | ZR巴辛珠溶解/过滤管，含0.5 mm珠(50 ml) | 25包 | 191.00美元 | |