快的-dna midiprep plus套件
D4075.
![Quick-DNA MIDIPREP Plus套件](https://cdn.shopify.com/s/files/1/0016/3731/8726/products/D4075-Quick-DNA-Midiprep-Plus-Kit_large.png?v=1588502346)
强调
- 从任何生物流体,培养/单层细胞或固体组织容易且可靠地提取高质量的DNA。
- Zymo-Spin技术确保DNA已准备好用于所有敏感的下游应用,例如QPCR,DNA测序,阵列和甲基化分析。
描述
洗脱量 | ≤200μL. |
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设备 | 水浴或散热块(55°C),离心机或真空源和歧管,微量纤维,涡旋,圆锥管(15-50mL)和微量离心管。 |
纯度 | 高质量的DNA已准备好所有敏感的下游应用,如PCR,内切核酸酶消化,Southern印迹,基因分型,下一步测序,亚硫酸氢盐转化等(A260 /A230≥2.0)。 |
尺寸范围 | 能够回收基因组和线粒体DNA大小的碎片> 50kb。如果存在,寄生,微生物和病毒DNA也将被回收。 |
补充信息 | |
工作流程 | 利用蛋白酶K消化和Zymo-Spin柱,以有效恢复DNA。 |
屈服 | 柱的DNA结合能力为125μg。通常,哺乳动物组织产量:每镁骨骼,心脏,肺和脑组织1-3μgDNA和每镁肝肾3-5μgDNA。人类全血将每100μl血液产生3-7μgDNA。 |
Q1:消化缓冲区之间有什么区别?一个缓冲区可以用于所有样本类型吗?
生物流体和细胞缓冲液(红色)设计用于用易于溶解的样品(例如哺乳动物细胞和生物流体)来允许快速蛋白酶K消化。与使用生物流体和细胞缓冲液(红色)相比,固体组织缓冲液(蓝色)可用于任何样品类型并需要更长的PK消化时间。
Q2:罐头快的-DNA工艺粗裂解物?
是的,将4体积的基因组裂解缓冲液加入1体积的粗裂解物,均匀化或消化的样品(参见细胞悬浮液和蛋白酶K消化样品),并采用剩余的方案。
Q3:添加β-巯基乙醇的目的是什么?这一步可以替代或省略吗?
β-巯基乙醇是一种还原剂,有助于分解蛋白质并改善DNA回收和纯度。建议添加β-巯基乙醇以增强样品裂解,但可以用二硫醇(DTT,终浓度为10mM)取代或省略。
Q4:我可以使用快的-dna plus以清理先前分离的dna?
不,该套件设计用于直接使用生物样品。对于先前分离的DNA的清理,请使用基因组DNA清洁和浓缩器或DNA清洁和浓缩器试剂盒。
Q5:每个样品类型的预期产量是多少?
请记住,样品采样可变性。
样本类型 | 输入金额 | 预期收益率 |
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真核细胞 | 1x106.细胞 | 5-6μg. |
骨骼,心脏,肺,脑组织 | 1毫克 | 1-3μg. |
肝肾组织 | 1毫克 | 3-5μg. |
人类的全血 | 100μl. | 5-7μg. |
Q6:我看到一些产生的血液样本不一致,发生了什么?
白细胞,这是血液中基因组DNA的主要来源,容易迅速地稳定。在等分试样纯化之前将血液样品混合。
Q7:可以在DNA / RNA护罩中进行蛋白酶K消化过夜吗?
是的,可以在一夜之间消化样品。确保遵循附录(第8页附录B)以处理DNA / RNA护罩中的液体样品,并在室温下孵育。
Q8:之间有什么区别快的-DNA和快的-dna plus套件?
这快的使用单个裂解/结合缓冲液针对细胞,软组织和均质/消化的样品进行优化。这快的-DNA Plus套件含有优化的蛋白酶K,用于加工较宽的种类样品输入,例如细胞,血液,组织等升级快的-DNA Plus与与此相比更高纯度更高的DNA快的-DNA套件。
Q9:可以快的-dna plus套件与细菌样品一起使用?
E.coli.细胞易于溶解,可以直接用生物流体和细胞方案加工。对于任何类型的微生物(包括艰难到Lyse)的全包套件,使用任何Zymo研究的环境套件(例如快的-DNA真菌/细菌,快的-DNA粪便/土壤,Zymoomics DNA等)。
猫 # | 姓名 | 尺寸 | 价钱 | |
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C1001-50 | 收集管 | 50包 | 15.00美元 | |
C1029-25 | Zymo-Spin V-E柱W / 15 ml圆锥形水库 | 25包 | $ 95.00 | |
D3004-200. | G-DNA洗涤缓冲液 | 200 ML. | $ 54.00 | |
D3004-5-250 | DNA预洗缓冲液 | 250毫升 | $ 71.00 | |
d4068-2-22 | 固体组织缓冲液(蓝色) | 22毫升 | $ 38.00 | |
d4068-1-45 | 生物流体和细胞缓冲液(红色) | 45毫升 | 59.00美元 | |
D3004-4-10 | DNA洗脱缓冲液 | 10毫升 | $ 14.00 | |
d3004-1-150 | 基因组裂解缓冲液 | 150毫升 | $ 73.00 | |
D3001-2-20 | 蛋白酶K W /储存缓冲液组 | 20毫克 | $ 44.00 | |