Quick-DNA植物/种子小型套件
D6020
强调
- 快速而简单的方法，可以从难以散热的植物和种子样品中分离DNA。
- 超高密度bashingbeads是抗断裂的，并且化学惰性。
- Zymo-Spin柱技术与过滤结合可去除DNA产物中的多酚PCR抑制剂。
描述
| 适用于 | 所有灵敏的下游应用，例如QPCR和下一代测序。 |
|---|---|
| 洗脱量 | ≥50µL |
| 设备 | 微输出，涡流，细胞破坏者/粉碎机 |
| 处理量 | ≤150mg |
| 纯度 | A260/A280nm≥1.8。 |
| 样本源 | 叶，茎，芽，花，水果，种子等。 |
| 样品存储 | DNA存储在≤ -20°C下。 |
| 尺寸范围 | 能够恢复至40 kb的基因组DNA。典型的片段尺寸范围从25 kb -35 kb。如果存在，也将回收寄生和病毒DNA。 |
| 补充信息 | |
| 类型 | 总DNA |
| 屈服 | ≤25µg总DNA |
问题1：您可以提供经过测试的植物物种的清单吗？
除了我们在协议中显示的内容外，我们目前没有植物清单： -A.thaliana- 杜松 - 乳草叶 - 乳草叶传单 - 乳草植物前芽 - 玉米仁 - 葵花籽 -烟草sp。
Q2：我的裂解物似乎是粘性的。是什么原因导致这种情况？我怎样才能解决这个问题？
粘性样品可能表明样品裂解不完全。尝试使用较少的样品并优化珠子跳动条件（持续时间，速度，时间），以确保样品彻底裂解。珠子跳动后，在继续前进之前将细胞碎片颗粒。在裂解液中添加更多的基因组裂解缓冲液可以帮助稀释和剥夺样品，从而使样品较少粘稠，更适合DNA恢复。
Q3：有什么技巧可以使珠子跳动条件做出任何措施？
我们已经用高速同伴和低速破坏者验证了我们的套件。我们强烈建议用户为自己的乐器优化其珠子跳动条件。我们建议使用2毫升管适配器来确保珠子跳动是有效的（请勿使用由泡沫制成的适配器）。对于高速匀浆器，我们建议总共5分钟的珠子跳动（以6.5 m/s的速度间隔1分钟，休息5分钟，重复5次）。对于低速细胞干扰器，我们建议以最大速度30分钟。
Q4：Zymo-Spin III-HRC步骤的目的是什么？
环境样品通常包含抑制剂，例如多酚，腐殖酸/富芬酸，单宁，黑色素等，通常会共纯化并影响下游应用，例如PCR。Zymo-Spin III-HRC色谱柱去除这些多酚PCR抑制剂，以恢复准备用于敏感下游应用的DNA，例如下一代测序，定量PCR等。
Q5：是否有必要添加β-汞乙醇？可以替换或省略此步骤吗？
建议添加β-汞乙醇以增强样品裂解，但可以用二硫代硫醇（DTT，最终浓度为10 mm）取代。但是，如果优化了珠子跳动并有效地裂解，则无需添加BME，可以省略。
问题6：何时可以在协议中实施RNase A治疗？
快速DNA试剂盒恢复了无RNA的基因组DNA。选择性化学允许将双束DNA与色谱柱结合并使RNA流过。在处理套件容量以内的样品时，无需治疗。
| 猫 ＃ | 姓名 | 尺寸 | 价格 | |
|---|---|---|---|---|
| D3004-1-100 | 基因组裂解缓冲液 | 100毫升 | $ 60.00 | |
| D3004-2-50 | G-DNA洗涤缓冲液 | 50毫升 | $ 18.00 | |
| D3004-4-10 | DNA洗脱缓冲液 | 10毫升 | $ 14.00 | |
| D3004-5-250 | DNA预洗缓冲液 | 250毫升 | $ 71.00 | |
| D6001-3-40 | BashingBead缓冲区 | 40毫升 | $ 29.00 | |
| D6035-1-30 | 准备解决方案 | 30毫升 | $ 18.00 | |
| C1057-50 | Zymo-Spin III-F过滤器 | 50包 | $ 59.00 | |
| C1058-50 | Zymo-Spin III-HRC过滤器 | 50包 | $ 108.00 | |
| S6003-50 | ZR BashingBead裂解管（2毫米） | 50管 | $ 101.00 | |
| C1078-50 | Zymo-Spin IICR列 | 50包 | $ 55.00 | |