dsdna shearase plus
E2018-50 / e2018-200
dsdna shearase plus
| 猫 ＃ | 姓名 | 尺寸 | 价格 | 数量 |
|---|---|---|---|---|
| E2018-50 | dsdna shearase plus | 50 u | $ 116.00 |
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| E2018-200 | dsdna shearase plus | 200 u | $ 424.00 |
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文件
强调
- 生成随机终止的dsDNA片段的最简单方法。
- 片段大小可以通过调节酶浓度来控制。
- 使用dsDNA剪切酶加生成的片段非常适合图书馆结构，下一代测序，甲基化的DNA免疫沉淀（MEDIP，MEDIP-SEQ）等等。
描述
| 专注 | 1 U/µL |
|---|---|
| 酶失活 | 在65°C下加热杀菌酶5分钟。 |
| 贮存 | 在-20°C下存放长达12个月。避免重复冻结/解冻试剂。延长存储在≤ -70°C。 |
| 单位定义 | 将一个单位（1 U）定义为将250 ng人DNA转换为DNA片段所需的酶量，在20分钟内，在42°C的总反应体积为10 µL的20分钟内，在100-500 bp的范围内。 |
Q1：切割位点是否有序列偏好？
是的，我们观察到第二个垒中有更多的“ t”。只有一键和第二垒有点不平衡，但是从第三个基碱基开始平衡核苷酸的分布。
Q2：可以对反应缩放/向下缩放吗？
基因组DNA：酶比是DSDNA剪切酶加反应的最关键步骤。在调整DNA输入时，有必要按比例比例地缩放酶的量。
- 5x反应缓冲液
- 体积
- 2 µL
- 4 µL
- 8 µL
- 模板DNA
- 体积
- 250 ng（x µl）
- 500 ng（x µl）
- 1 µg（x µl）
- 水
- 体积
- 7 µL - X µL
- 14 µL - X µL
- 28 µL - X µL
- dsdna shearase plus
- 体积
- 1 µL
- 2 µL
- 4 µL
- 总容积
- 10 µL
- 20 µL
- 40 µL
问题3：如何确保酶已经灭活？
可以通过在65°C下孵育5分钟来灭活酶。DNA清洁和浓缩器5（D4003）可用于清理反应。
Q4：可以使用安培珠来清理反应吗？
是的，请遵循制造商的协议。您也可以使用精选的DNA清洁和浓缩器Magbead套件。
Q5：RNA可以用作DSDNA剪酶Plus的底物吗？
dsDNA shearase plus为dsDNA特异性，因此，如果样品中存在RNA污染，RNA将保持完整。DNA和RNA之间的杂交可能发生在RNA污染的样品中，从而降低了片段化的性能和效率。我们建议将无RNA DNA作为底物。
Q6：是否受DNA甲基化影响的酶消化？德赢vwin体育平台入口
酶活性不受甲基化的影响。酶已经用人，小鼠和植物DNA进行了测试，并且性能是相同的。
Q7：为什么酶不能正确剪切？
以下是一些可能的原因：•dsDNA shearase Plus对dsDNA有特异性，对ssDNA不有效。•样品中存在的RNA污染物显着影响酶的性能，以检查您的DNA样品的质量，因为在42°C孵育期间可能发生DNA/RNA杂交。•确保在反应中正确缩放或向下缩放酶。
“我相信我们的整个实验室都希望切换到剪切酶，以结束我们目前正在为芯片，MEDIP和MEDIP-SEQ实验所做的所有超声处理。”
-Garrett K（伯明翰阿拉巴马大学）
| 猫 ＃ | 姓名 | 尺寸 | 价格 | |
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