所需总RNA的数量可能因靶转录物的表达水平而异。一般来说，我们建议使用0.1 pg - 5µg的输入RNA。

ZymoScript一步RT-qPCR试剂盒中使用的染料已经在下游分析中进行了彻底的检测。在规定的浓度下，它不会影响qPCR过程中的荧光信号读数。

降解和不纯的RNA样品信号较低。我们建议使用Quick-RNA或Direct-zol试剂盒(参见相关产品)进行高质量的RNA提取。德赢vwin体育官方网址

缺失或延迟扩增的一个可能原因是引物与模板的结合效率不高。确保使用的退火温度(所提供的协议中的步骤4)至少比引物的最低熔化温度低2℃，以确保有效结合到目标序列。

是的，反应可以在室温下进行。酶只在较高的温度下被激活，以确保最大的特异性。

我们不建议在室温下长时间储存套件或套件组件。本试剂盒可在4℃保存1周。

样品可以用DNase I处理以消除DNA污染。DNase I包含在推荐用于RNA提取的Quick-RNA或Direct-zol试剂盒中。或者，DNase I套装(参见相关产品)可以单独购买。德赢vwin体育官方网址

不，RNase抑制剂已经包含在酶混合物中，以防止逆转录过程中不必要的RNA降解。

对于单个目标检测，基于SYBR Green的分析提供了更经济的解决方案。以SYBR Green为基础的检测，每20µl RT-qPCR反应中加入1µl的荧光染料溶液(20X)。基于TaqMan探针的分析一般比基于SYBR Green的分析更昂贵。然而，当同时分析多个目标和需要高水平的特异性时，它们呈现出优势。在进行基于TaqMan探针的检测时，不要在RT-qPCR反应中加入荧光染料溶液。

不，被动对照染料不包括在内。

这取决于不同的因素，包括RNA完整性和引物效率。一般来说，该产品的放大器长度在50 bp到1.5 Kb之间，性能最好。